R-loop是一种由RNA:DNA杂合链和单链DNA组成的特殊核酸结构 ，在原核和真核生物的基因组中漫衍普遍且普遍保存。R-loop在许多要害的生物学历程中施展主要功效 ，包括染色质修饰、转录调控、DNA损伤修复以及基因组稳固性等 ，但其怎样被准确调控的机制尚不清晰。m6A修饰作为信使RNA上品貌最高的修饰类型 ，普遍加入哺乳动物的发育、免疫、干细胞更新、脂肪分解、以及肿瘤天生和转移等生命历程。然而 ，现在尚不清晰m6A是否能作为R-loop中RNA组分的本源特征来调控R-loop水平 ，进而施展种种生物学功效。
中科院北京基因组研究所杨运桂、任捷与清华大学生科院孙前文团队相助研究 ，发明m6A能稳固R-loop的形成 ，进而调控基因转录的有用终止。这一效果以《m6A promotes R-loop formation to facilitate transcription termination》为题于10月12日在线揭晓于《细胞研究》（Cell Research）杂志。
研究团队首先通过黑点分子杂交和免疫荧光手艺 ，发明敲低m6A甲基转移酶METTL3显著降低R-loop水平 ，且该调控作用依赖于METTL3甲基转移酶活性。随后 ，团队成员使用高效液相色谱团结质谱手艺 ，发明相较于染色体团结的RNA（caRNA） ，R-loop的RNA组分有越发富集的m6A修饰。进一步使用基于单链DNA建库的DNA:RNA杂合链免疫共沉淀高通量测序手艺（ssDRIP-seq） ，发明下调的R-loop主要富集在转录终止区域 ，R-loop转变水平与m6A的距离和修饰水平相关。为了探索m6A对R-loop调控的生物学功效 ，研究团队绘制了RNA聚合酶转录位点的高区分率图谱 ，并在MYC、ACTIN基因上举行多种转录活性检测 ，发明m6A增进R-loop形成是转录终止阶段的要害办法 ，可以避免RNA聚合酶的转录通读。最后 ，团队成员构建了针对转录通读的报告基因系统 ，通过m6A修饰位点的突变进一步证实m6A关于R-loop形成及转录终止的要害作用。
该研究发明了m6A甲基化修饰的共转录调控功效 ，展现了RNA甲基化修饰对染色质结构的影响 ，以及R-loop结构中的RNA组分被修饰后对其自身稳态的调控机制 ，阐释了m6A通过稳固R-loop而增进转录正常终止的征象 ，为进一步研究m6A与R-loop的调控机制和响应生物学功效提供了基本的手艺和理论支持。
该研究获得了永利集团战略性先导科技专项、国家自然科学以及国家重点研发妄想等基金资助。
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m6A甲基化修饰调控R-loop的形成及转录终止机制
